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硫配糖体

  蓝色琼脂糖凝胶 6FF 行使注释 1 简介 本产物将蓝色染料偶联到交联及活化的琼脂糖凝胶上, 该填料具有很高的化学宁静性。 蓝色 琼脂糖凝胶与倾向卵白的联络闭键是配基供应的电子对影响与疏水影响的归纳结果。 该亲和 色谱填料利用周围很通俗,可实用于白卵白、扰乱素、α2巨球卵白、凝血因子及各样必要 NAD 和NADP 的酶的差别纯化。 本产物宁静性好,基团零落少,行使寿命长,行使简单,利用通俗。 2 亲和填料性子 特质 基质 配基 配基密度 吸附载量 亲和填料的颗粒巨细 最大流速 pH 周围 行使温度 生存温度 生存液体 3 实用周围 蓝色琼脂糖凝胶实用可实用于白卵白、 扰乱素、 α2巨球卵白、 凝血因子及各样必要NAD和NADP 的酶的差别纯化。 4 利用实例 实践名称:从发酵液中去除牛血皎皎卵白 实践设施: 基团零落少,联络特异性强 6%的交联琼脂糖凝胶 蓝色染料 ≈7μmol/ml 18mg BSA /ml 45-165μm 300cm/h 3-10,正在位冲洗时 pH 周围可到 2-13 4℃~常温 +4~8℃ 20%乙醇 + + (1)蓝色琼脂糖凝胶6FF装柱,1.6×20cm,柱床体积为15ml; (2)用缓冲液1均衡5-10个床体积,流速为4ml/min; (3)含牛血皎皎卵白的样品离心,用缓冲液1举行1:1稀释,0.45μm滤膜过滤,上样。流速 为2ml/min; (4)用缓冲液1再洗5-10个床体积,流速为2ml/min; (5)用缓冲液2洗脱,流速为2ml/min,汇集洗脱峰; (6)用纯水流洗5个柱床体积,再用20%的乙醇流洗5个柱床体积,流速为4ml/min,柱子置 于4~8℃情况中生存; (7)将差别纯化的BSA举行SDS-PAGE电泳分解。 缓冲液构成: 缓冲液1:50mM KH PO ,pH7.0。缓冲液2:50mM KH PO ,大地彩票1.5M KCl,pH7.0。 2 4 2 4 注:以上缓冲液须经0.22 μm滤膜过滤。所得结果如下图: 亲和填料利用的留意事项 (1)该凝胶从冷室或冰箱中取出后最好正在室温下怠缓振摇复兴到室温,然后再装柱,免得 产发怒泡影响柱效。 (2)第一次行使得先用20%的乙醇洗5个柱床体积,然后再用2M NaCl洗5个柱床体积,洗去 残留的染料,再均衡行使。 (3)上样样品务必与缓冲液1的pH、电导相仿。 (4)蓝色琼脂糖凝胶FF亲和填料的再生执掌伎俩:用0.5MNaOH含2MNaCl流洗3个床体积,最 后用20%乙醇洗 3个床体积即可。 (5)该亲和填料生存要求为20%乙醇, 4~8℃。

  蓝色琼脂糖凝胶 6FF行使注释_生物学_自然科学_专业材料。本产物将蓝色染料偶联到交联及活化的琼脂糖凝胶上,该填料具有很高的化学宁静性。蓝色琼脂糖凝胶与倾向卵白的联络闭键是配基供应的电子对影响与疏水影响的归纳结果。该亲和色谱填料利用周围很通俗,可实用于白卵白、扰乱素、α2巨球卵白、凝血因子及各样必要NAD+和NADP+的酶的差别纯化。


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