Purification engineering technology research center of Sichuan Province Natural Medicine
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类异戊二烯

  林思妮;太子参皂苷合成要害酶HMGR基因的克隆与转化烟草磋议[D];福修农林大学;2016年

  郝金凤;李彤彤;郭艳琼;顶峰;哈斯阿古拉;;甜瓜HMGR基因全长cDNA的克隆及序列理解[J];生物本领转达;2010年08期

  王启超;橡胶草HMGR基因的克隆及外达理解[D];海南大学;2011年

  王秋军;露珠草HMGR基因的克隆理解及20-羟基蜕皮甾酮生物合成调控磋议[D];姑苏大学;2014年

  方针自然橡胶是一种特别品格的生物聚会物,而不行被人工合成的橡胶所庖代,自然橡胶的生物合成是通过产胶植物的类异戊二烯代谢途径举办的,比方橡胶树、杜仲、银胶菊、橡胶草(又称俄罗斯蒲公英)等等。此中橡胶草不断从此被以为是低本钱的潜正在橡胶替换源泉,他们孕育周期短、遗传转化编制完竣。正在他们的根部能够合成高质地的自然橡胶,而改变后的橡胶草即是一种更具有经济价格可不断操纵的产胶草本植物,所以正在橡胶坐褥行业是一种有成长前景和能够贸易化的资源。本磋议首要是通过正在橡胶草中过量外达HMGR基因来独揽橡胶草甲羟戊酸代谢途径中的异戊烯焦磷酸的合成,进而磋议该基因正在产胶代谢中的用意。所以橡胶草是磋议植物产胶机理的优秀形式植物,其乳管也能够行为产胶性能基因占定平台,是具有成长出息的产胶植物。门径本磋议正在优化的橡胶草再生编制的根底上,分辩以橡胶草c DNA和橡胶树的DNA为模板,克隆橡胶草HMGR基因和橡胶树HMGR1基因的特异性启动子Hb HMGR基因,对HMGR基因举办了生物新闻学理解。构修原核外达载体,转化BL21菌株并诱导外达;构修细胞调解外达载体,转化GV3101菌株并侵染洋葱外皮细胞,正在共聚焦显微镜下视察基因外达情景;构修植物过外达载体,通过农杆菌介导法转入橡胶草,得到转基因植株,转基因植株分子检测的结果声明外源基因仍旧整合到橡胶草基因组中,并对转基因橡胶草举办了基因外达量理解。结果(1)克隆得到橡胶草HMGR基因和橡胶树HMGR1基因的特异性启动子Hb HMGR1基因,HMGR基因含有一个1749bp巨细的盛开阅读框,编码582个氨基酸,HMG-Co A还原酶属于HMG-Co A还原酶超家族中的一员;(2)构修原核外达载体,经IPTG诱导和SDS-PAGE检测,HMGR卵白正在BL21菌株中胜利外达,分子量为62.6591KDa,当诱导6h时外达量最高;(3)构修细胞调解外达载体,亚细胞定位结果显示,HMGR-GFP调解卵白首要定位于细胞膜和核膜上;(4)对橡胶草的再生编制优化的结果声明,以橡胶草的叶柄行为外植体,诱导大概芽的激素配比为1mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA,大概芽生根的激素配比为0.1mg/L NAA;(5)构修植物过外达载体pCAMBIA2300-35S-Tk HMGR和p CAMBIA-1303-Hb HMGR1-Tk HMGR,采用农杆菌介导法侵染橡胶草茎,经PCR占定得到转基因橡胶草,对得到的转基因橡胶草举办Real Time-PCR理解,声明外源基因随机整合到橡胶草的基因组里,并正在RNA程度上获得转录;(6)提取转基因橡胶草的三萜和橡胶,举办了理解和测定,结果声明准基因橡胶草的三萜含量有明显地增添,而橡胶略微有所增添,但没有抵达明显程度。

  赵李婧;橡胶草HMGR基因的克隆及性能理解[D];石河子大学;2016年

  王倩;HMGR基因外达载体构修及其对丹参遗传转化的磋议[D];陕西师范大学;2005年

  郑鹏;化文平;王喆之;;秦艽HMGR基因家族的克隆及序列理解[J];陕西师范大学学报(自然科学版);2012年06期

  马春英;甘草种类选育根底及HMGR基因克隆磋议[D];北京中医药大学;2009年

  罗红梅;宋经元;李雪莹;孙超;李春芳;陈士林;;人参HMGR基因克隆与外达理解[A];中药与自然药顶峰论坛暨第十二届宇宙中药和自然药物学术研讨会论文集[C];2012年


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